求高手指点！HPLC的计算问题

请教高手！

附件中的反应式 中，合成产品在HPLC检测条件下，出2个色谱峰，分别是 左边的反应产物：盐酸左旋氯哌丁和 芬地作酸，而左旋氯哌丁（不带盐酸盐）这个成分 ，是起药物 作用的 主成分，因为最终产物分左旋体和右旋体。

那我想计算 反应产物的含量（也就是药物中这个产物的含量）时，如何计算？是反应产物的 HPLC上的2个色谱峰面积进行加和吗？

但是专家建议，按照    氯哌丁的盐酸盐来计算，在根据分子量进行折算出绝对量，绝对量/理论量=标示含量%，

但是我现在不清楚的是，以氯哌丁盐酸盐来计算，公式中的上下两个峰面积  都是氯哌丁盐酸盐的峰面积，如果 1：1反应完全的话，直接由公式计算的结果就是 反应式右面 这个产品的标示量，这样理解对吗？？？

谢谢！如果遇到过同样问题的专家 或者高手，请不吝赐教！！！再次表示万分感谢！

关键是你拿什么当对照品？
两个峰面积相加明显不可行。如果两个成份不是1：1呢？假如析晶过程中导致哪一个过量，有可能算出结果还是符合要求的呢。

个人认为
1、如果是用HPLC方法来检含量的话应该以氯哌丁的峰面积来计算含量。
盐酸氯哌丁的含量也应只计算氯哌丁的峰面积，因为盐酸是不会出峰的。
按分子量计算量论含量应该是329.89/366.35=90.05%
芬地作酸氯哌丁的理论含量应该是329.89/648.22=50.89%
2、另外药典中以这种形式存在的药物绝大部分都是用滴定的方法测的含量，其道理也是测里面碱基的数量，然后折合成含量，基本就是100%左右，这种方法不需要对照品，但个人认为不准确，专属性也差，但药典中就存在大量这种方法，很是不解。

看不懂

@368 发表于 2015-3-16 14:23
关键是你拿什么当对照品？
两个峰面积相加明显不可行。如果两个成份不是1：1呢？假如析晶过程中导致哪一个 ...

非常感谢老师及时的解答！

我们测定时采用的是 制成品的纯品作为对照品。


是在申报一个药物制剂，反应式右面的合成物  作为原料药，进行药物制剂的配制，现在是对 这个药物制剂中的有效成分（原料药） 进行含量测定。

请问，老师，能给一个最终含量测定的计算公式吗？我自己把自己搞糊涂了，谢谢！！！！ HPLC外标法测定的

woshishanhua 发表于 2015-3-17 09:22
非常感谢老师及时的解答！

我们测定时采用的是 制成品的纯品作为对照品。

制剂的含量我不太清楚，自制对照品是否还需要标定含量，或者就当100%算。
公式应该是通用的。仅供参考。

样品峰面积 × 对照品含量 × 对照品重量
------------------------------------------------- × 100%
        对照品峰面积×样品重量


峰面积都是指左旋氯哌丁的峰面积。
样品跟对照品稀释倍数一样就行。

非常感谢老师非常及时 细致的解答！！！向您致敬！感谢！

药典里大多数方法里， 以滴定法为仲裁法（暂这样理解吧），我以为是这样的，要注意前提：纯品。如果红外证明样品不纯，是不能上药典的。因此，药品的检验不只是含量测定来证明一切，还要配合其他检测项目才是完整的检验。

高手在人间