泥附子一步煎煮制备附子配方颗粒的创新工艺与质量评价

中药配方颗粒

以符合炮制规范的中药饮片为原料，经过水提、浓缩、制粒而成的现代饮片形式
附子
被誉为“回阳救逆第一品药”， 治病保命“药中四维”

问题

以产量最大、应用最广的黑顺片为例，传统的加工工艺，尤其是防腐的泡胆工艺，双酯型生物碱含量损失高达 70% 以上，加之后续的煮制、去皮、切片、退胆漂片、干燥等工艺，生物碱损失高达 90% 以上。由于在饮片炮制环节，生物碱已然大量流失，由其制备优质配方颗粒面临巨大的挑战。

设想
随着附子炮制减毒机理的逐步揭示，剧毒的双酯型生物碱在加热条件下( 60°C 以上) 快速水解为微毒的单酯型苯甲酰生物碱，毒性降低为双酯型生物碱的 1 /50～1 /500，基本达到解毒目的 。因此，设想能否在配方颗粒这一新载体上，直接以新鲜泥附子为原料，利用工业化大容量提取，直接促进饮片中的剧毒成分降解，实现解毒; 同时，由于无其他繁复的中间环节， 附子中各类成分( 尤其是水溶性生物碱) 得以最大程度的保留。

方案

用泥附子作为生产配方颗粒的原料，优化其制备工艺，同时建立HPLC－MS/MS 法同时检测附子配方颗粒中乌头碱(AC)、新乌头碱(MA)、次乌头碱(HA)、印乌头碱(DA)、苯甲酰乌头原碱(BCA)、苯甲酰新乌头原碱（BMA)、苯甲酰次乌头原碱(BHA)、乌头原碱(AN)、去甲乌药碱(HI)、去甲猪毛菜碱(SA)、尼奥林(NE)、附子灵(FU)、宋果灵(SO)、塔拉乌头胺(TA)等14个毒性、强心、镇痛抗炎、抗心率失常成分含量，与A厂家3个批次附片配方颗粒活性成分的含量进行比较。该研究有望提供一种优质附子配方颗粒的制备方法，为高效利用天然药物资源，制备现代优质饮片奠定了重要基础。

方法

1.选用一定的色谱条件；
2.配置对应的标准品溶液；
3.供试品溶液的制备；
4.利用方法学验证试验该方法的稳定性、精密性、准确性等；
5.以AC，MA，DA，HA 4个剧毒成分的含量以及BAC，BMA，BHA，AN，FU，NE，TA，SO，HI，SA10个有效成分的含量为指标，以加水量、提取时间、提取次数进行单因素实验设计，对煎煮工艺的各参数进行考察优化。

优化试验结论
提取次数：提取次数为1次、2次、3次。不同提取次数下双酯型生物碱总量均达到用药要求，综合考虑，确定附子配方颗粒提取工艺的提取次数为1次。

加水量：分别按料液比为1:6、1:8、1:10、1:12 加入超纯水。表明各种溶媒用量下4个双酯型生物碱的含量均符合要求。综合考虑，最终确定附子配方颗粒提取工艺的料液比为 1:6。

提取时间：回流提取 0. 5，1，2，4，6，8h。在提取初期，双酯型生物碱含量急剧降低，提取4h之后虽然仍在降低，但总体趋势已趋于稳定；因此确定提取时间为4h。

提取工艺的验证：3 次提取验证实验中BAC，BMA，BHA，AN，FU，NE，TA，SO，HI，SA10个有效成分的含量分别1.770%，1.734%，1.760%，三次提取验证实验中4个剧毒成分的含量分别为0.002%，0. 003%，0.003%，表明该工艺稳定可靠，14个生物碱成分提取较为完全，安全存效，可应用于泥附子的提取。

配方颗粒验证结论

以优选的泥附子提取工艺制备附子配方颗粒，每1g配方颗粒相当于药材1g；

讨论

在品质方面： 新工艺制成的配方颗粒与现有工艺制备的配方颗粒毒性成分含量相当，均小于0. 01%，足以确保口服用药安全; 但新工艺制得的附子配方颗粒10 个有效成分的含量为1.352%，而市售附子配方 颗粒含量 仅 为 0.834%，0.854%，0.892% ; 新工艺的配方颗粒在品质上有明显优势。

在资源方面： 新工艺1g泥附子制成1g配方颗粒， 而现有工艺6g黑顺片或白附片制成1g配方颗粒; 考虑到通常需要3～4kg泥附子才能制成1kg黑顺片或白附片，新工艺仅需使用 1 /18～1 /24 的泥附子，就能制出同质或更优质的产品。


图：自制附子配方颗粒与市售附子配方颗粒聚类分析结果（A、C）与主成分分析结果（B）

分析
由于14个生物碱类成分在不同配方颗粒中的含量不同，趋势也不一致，因此采用聚类分析和主成分分析法对实验数据进行降维处理，观察 14 个化学成分的分布情况。

图A:自制附子配方颗粒与 A 厂家样本组间差异较大,而A厂家3个批次样本组间差异小;

图B:自制附子配方颗粒中HI，AN，BHA，SA，FU，SO，TA， HA，NE，BMH，BAC含量明显优于A厂家；

图C:将实验数据标准化后导入 Metabo Analyst 3. 0 数据分析软件中，知道A 厂家 3 个批次配方颗粒与自制配方颗粒明显分为 2 组这种自然聚类反映出不同工艺制备的配方颗粒品质的客观差异; 同一厂家不同批次的配方颗粒也存在一定差异。

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