反相柱使用笔记

把以前在学校做的反相柱使用经验写了个小结，大伙指正。
反相柱使用笔记
1，        摸条件
反相板使用：
（1）展开剂，用甲醇比较少的比例开始展开
                     依据氯仿：甲醇在正相板上的展开情况选择
例：氯仿：甲醇=85：15，RF=0.5,可用70%甲醇：水展开
若RF=0.15—0.2，即可作为常压柱流动相
（2）显色剂：10%稀硫酸乙醇液显色，烘烤出一点颜色能看出点即可
（3）反相板再生：显色完后，把板倒回来用甲醇展开，将点推回至底端。如此可重复使用2-3次
2，上样
   上样前样品先过滤，一般用第一个梯度溶解，无法溶解也可以用甲醇溶解，但用尽量少的甲醇，要保证样品为液态，不粘稠，颜色为茶褐色为佳。且样品不能过载
3，        平衡
用第一个梯度平衡。如用70%甲醇：水为第一流动相，应用90%-80%-70%过渡平衡。
4，        流动相
最好先过滤，如同做HPLC时一样。或者用色谱甲醇。（柱子用完后用甲醇保护时，甲醇中若含有水，会放出热量，使柱子断层）
5，        流速与流分
常压柱，流速越快越好，一般一个小瓶接一流分（15ml）
6，        点板合并
定量点板，将板画成小方格，每个小方格点一瓶，不用展开即显色。若为一样合并蒸干。


新型材料
MCI用于富集皂苷，MDS耐强酸强碱，但是预处理麻烦，内含甲苯！ 两者原理均似反相
香草醛显桃红色：寡肽、酚酸、苯乙醇苷等
二氢黄酮香草醛不显色，但是碘缸显色。
一般先做核磁谱，与文献对照后，打分子量核实。


文献：所有化合物的谱图，理化性质，提取分离方法
      哪种提取方式得到哪些化合物，哪种提取方式得到最多新化合物。
萃取液做HPLC,峰最强的最先分离，再分量少的东西
   可以从中等极性开始练习，因为中等极性比较好分离得到。因此我们可以从乙酸乙酯部位开始分离。
   一般正相板用5：1—1：1展开都可以算大极性物质，可以用反相柱
  一般正相柱流动相冲到1：1或1：2即可。
反相柱只能用酸洗！

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